Штамм @ @ 907/2062,обладающий активностью в отношении @ - вибрионов 05 серовара,не относящихся к 01 группе
Штамм Phagum Nag 9р7/20б2; Ф-114 ( коллекция фагов Тбилисского НИИ вакцин и сывороток), обладающий активностью в отношении Nag -вибрионов 05 серовара, не относящихся к 01 группе. i
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК
„„SU„„92949 цр ф С 12 N 7/00
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Н ABTOPCKOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ
1 и,.
БКЬЛЫ6; -;",:
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
IlO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ
/ (21) 3560292/28-13 (22) 12.01.83 (46) 30.11.85.Бюл.¹ 44 (71) Всесоюзный ордена Трудового
Красного Знамени научно-исследовательский противовирусный противочумный институт "Микроб" (72) В.П.Мороз, Н.М.Остроумова, 3.М.Агапова, Г.И.Коровкина и Н.II,.Êîííîâ (53) 576.8.077 (088.8) (56) Авторское свидетельство СССР № 635131, кп. С 12 N 7/00, 1978.
Авторское свидетельство СССР № 888540, кл. C 12 Я 7/00, 1980. (54) ITAMM Phagum Nag 907/2062, ОБЛАДАЮЩИЙ АКТИВНОСТЬЮ В ОТНОШЕНИИ
Nag- ÂÈÁÐÈÎÍÎÂ 05 СЕРОВАРА, НЕ ОТНОСЯЩИХСЯ К Ol ГРУППЕ. (57) Штамм Phagum Nag 907/2062, Ф-114 (коллекция фагов Тбилисского
НИИ вакцин и сывороток), обладающий активностью в отношении Nag -вибрионов 05 серовара, не относящихся к
0l группе.
1 .10
Изобретение относится к медицинс- кой микробиологии и касается штамма бактериофага, обладающего активностью в отношении Nag-вибрионов 05 серовара. Известен штамм Phagum cholericum
78 yTI серотипа, активный в отношении Nag-вибрионов 044 серовара..
Известен Phagum Nag 91 для идентификации энтеропатогенных Nag -вибрионов 0-22 серотипа.
Однако известный штамм не позволяет идентифицировать Nag-вибрионы 05 серовара.
Целью изобретения является создание штамма Phagum Nag обладающего активностью в отношении Nag-вибрионов 05 серовара, не относящихся к
01 группе.
Эта цель достигается созданием штамма Phagum Nag 907/2062.
Штамм Phagum Nag 907/2062 получен в результате селекции мутантов фага 907 на газоне штамма 2062 Nag-вибриона
05 серовара.
Штамм хранится в коллекции бактериофагов Тбилисского. НИИ вакцин и сывороток под номером Ф-114 и характеризуется следующими признаками °
Величина негативных колоний на газоне НАГ-вибриона 2062,,выращенного на агаре Мартена, равна 1,47 +
+ 0,07. мм в диаметре. Край колоний неровный, дно прозрачное, по периферии - зона неполного лиэиса.
Фаг относится к У морфологической группе. его корпускулы имеют головку гексогональной формы величиной
625 Х и сложный отросток с сокращающимся чехлом размером 110 х 104 А., Бульон Мартена. При посевной дозе 1 101 микробных клеток V.Nag
2062 на 1 мл среды и множественности инфекции фагом 7 : 1 в течение 2 ч 15 мнн инкубирования при
37 С накапливается до и 10 его о частиц на 1 мл среды.
Одиночный цикл развития фага характеризуется минимальным латентным периодом, равным 40-45 мин, и средним урожаем 200 фаговых частиц иа одну инфицированную клетку.
Серологические свойства.
Относится к 1 серотипу умеренных
Nag агов 05 серовара. С известными 10 серотипами холерных фагов и
92949
S
Nag-фагами 91, 93 серологического родства не имеет.
Спектр действия.
В концентрации л 10 лиэирует
86Х штаммов Nag-вибрионов 05,серовара и не лизирует вибрионы других
05 сероваров.
Микроорганизмы блиэкородственных видов, родов и семейств: A2bensis
Proteus Aегоmonas, P1)esiomonas., Comamonas, Psendomonas, Parachemolyticus, Entегоbacteriaceae резистентны к действию фага Ф-114 (907/2062)(см,таблицу).
Штамм фага Ф-114 (907/2062 ) активно репродуцируется на клетках
Nag-вибриона 2062 в бульоне Мартена, рН 7,6. При посевной дозе
1 . 10 микробных клеток на 1 мл среды и множественности инфекции 7 : 1 в течение 2 ч 15 мин инкубирования при 37 С фаг накапливается до и 10 8 частиц на 1 мл среды.
Для получения диагностического препарата фага Ф-114 (907/2062) используют агар и бульон. Мартена, .рН 7,6. Культуру штамма-продуцента
2062 18-ти часового. роста при 37 С на arape Мартена засевают в бульон.
Мартена. Через 3 ч при 37 С бульонную культуру добавляют к питательной среде (бульон Мартена ) иэ расчета 1:10 микробных клеток на 1 мл т среды, туда же одновременно вносят фаг Ф-114 (907/2062 ) из расчета ,множественности инфекции 7:1. Через
2 ч 15 мин культивирования фаголизат фильтруют через бактериальные .фильтры марки Ф-З,Ф-5. Фильтрат разливают по ампулам и контролируют на специфическую и общую стерильность и активность.
Готовый препарат используют для диагностики. следующим методом.
Готовят газон исследуемого штамма в слое мягкого агара по Грациа, т.е. добавляют О,2 мп бульонной культуры исследуемого штамма к 5 мл 0,77. расплавленного: arapa(45ОС), перемешивают и выливают на агаровую пластинку в чашке Петри. После застывания второго слоя на его поверхность капают фаг Ф-114 (907/2062 )..
Чашку помещают в термостат при
37 С. Учет результатов проводят чео рез 4-8 ч. При обнаружении на месте нанесения фага литического пятна
Диапазон специфического действия фага
Ф-114 (907/2062) Вид культур ы
Холерный классический
119
Эль тор
Вибрион Nag с 02 по 04, серовара
05 серовара 130
08 серовара 20
85 . 85, 06,07 серовара с 09 по 021 серовара . 64
022 серовара 18
77 с 023 по 056 серовара
174
36
39
ВНИИПИ Заказ 7043/4 Тиран 524 Подписное
Филиал ППП "Патент", г.уагород, ул.Проектная, 4
3 j1092949 исследуемый штамм относят. к вибрио- Применение штамма фага Ф 114 нам 05 серовара. (907/ 2062 ) в лабораторной;практике
Широкое внедрение диагностичес- исключит:. необходимость постановки кого метода, основанного на исполь- серологическнх реакций, которые s насзовании штамма фага Ф-114 (907/2062):, у тояцее. время являются единственным позволит улучшить диагностику вибрио способом идентификации Яа -вибрионов . нов. определенных сероваров.
