Способ определения иммунологической реактивности организма
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ РЕАКТИВНОС ГИ ОРГАНИЗМА путем инкубацип исследуемой биологической и контрольной жидкостей с тест-культурой микроорганизмов по сопоставлению числа микроорганизмов в обеих пробах, отличающийся тем, что, с целью повышения точности, в качестве биологической жидкости используют цельную кровь, инкубацию проводят в течение 110-120 мин с последующим определением числа колоний микроорганизмов.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
PECflVEiflHH
„„SUÄÄ 1082399 зй11 А 61 В 10 00 С О! Х 33/48
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ n.
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К А BTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ а.л -., (21) 3302416/28-13 (22) 17.06.81 (46) 30.03.84. Бюл. № 12 (?2) Г. К. Палий, В. П. Непорада и Н. Д. Желиба (71) Винницкий медицинский институт им. Н. И. Пирогова (53) 612.017 (088.8) (56) .Бухарин О. В., Луда А. П. Методы определения естественной (неспецифической реактивности организма. Л., «Медицина», 1976, с. 51 — 52 (54) (57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕН и ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ РЕАКТИВНОС ГИ
ОРГАНИЗМА путем инкубаци исследуемой биологической и контрольной жидкостей с тест-культурой микроорганизмов по сопоставлению числа микроорганизмов в обеих пробах, отличающийся тем, что, с целью повышения точности, в качестве биологической жидкости используют цельную кровь, инкубацию проводят в течение 10 — 120 мин с последующим определением числа колоний микроорганизмов.
1082399 (..оставитель F. Ìfèïøêoâü
1 . кре;(!1. Г(прес "foððå(Tîð О. Билак
Тира>к 68В По,(писпое
131iNHI11! рос«дарственного колитета СССР по,.ела.": изобретений и откоытий
11303сь,"досквь, з"--згз Раув;скаг ((ги в 4/5
Филиал П!1Г1 «11а;-»-,: г. Ухкгоро, ул. (роектнин, 4...ктор . с (. „и(ь -;,,;, . 1(,и;(, (Изобретение относится к медицине и может оыть использовано в клинико-бактериологических лабораториях для изучения иммунологической реактивности организма.
Известен способ определения иммунологической реактивности организма путем исследования бактерицидной активности биологической жидкости до и после инкубации ее с тест-культурой микроорганизмов по отношению полученных показателей в 10 опытной и контрольных пробах (1).
Одна ко известный способ недостаточно точен, не позволяет учитывать клеточный иммунитет организма. Многократное разведение сыворотки приводит к искажению
15 получаемого результата. Кроме того, такой способ длителен и требует большого числа крови.
Цель изобретения — повышение точноСти способа.
Поставленная цель достигается тем, что эг1 согласно способу определения иммунологической реак.(.ивности организма путем инкубации исследуемой биологической и контрольной жидкостей с тест-культурой микроорганизмов но сопоставлению числа микроорганизмов в обеих пробах в качестве биологической жидкости ис.юльзуют цельную кровь. инкубацию проводят в течение 110—
120 мин с последующим опр(делением числа колоний микроорганизмов
Способ осугцествлГ1ют сл. дующим образом.
Кожу мякоти пальца обследуемого обрабатывают 96 градусным этиловым спиртом, прокалывают скариф:.(катором — копьем одноразового пользования. Выдавленные из ранки 1 — 2 капли крови забирают з5 стерильной пастеровской пи;(еткой, смоченной гепарином (100 МЕ(мл), 2 капли гепарпннзированной крови вносят в луночку пластины микротитратора Такаччи и смешивают с 1 каплей тест-: льтуры MHKDoopy
1 ганизма суточного роста, например стафилококка 209. Тщательно перемешанную реакционную смесь помещают HB 110 — 120 мин в термастат при 37 С. По(-.ле этого одну мерную петлю взвеси BHocR-f в (ашку Пеiри и равномерно перемешивают с 15 мл расплавленного и остуженного до 45 — 50 С мясопептонного агара. Подобные манипуляции проводят в трех контрольных луночках, в которых вместо крови внесен оизиологический раствор поваренной соли h тест-культура микроорганизма. Засеянные таким образом, чашки (1омещают на 18--24 ч в термостат при 37 С. По истечении времени инкубации подсчитывают коли ес зо колоний, выросших на опытных и контрольных чашках Петри.
Иммунологическую реактивпос-. организма определяют по формуле
ИРО = 100 — — — - — — —, H,.-. где ИРΠ— иммунологическая реактивность организма;
Н, — количество колоний в опыте;
Н„„— количество колоний в контроле.
Пример 1. При инкубации тест-культуры микроорганизмов с кров1по донора на питательной среде образовалось 38,0 колоний (в контроле 720 коло.(ий 1
ИРО донора = 100 — — -"-:=- — — — — — = 95 /в. е:с Ю у ЯОЯ
Пример 2. При инкубации тест-культуры микроорганизмов с кровью больного хроническим холицеститом образовалось
340 колоний (в контроле 720 колоний) И1эО оольного ==- 100 Ж з <00 -3в (20
Таким .,",,:;-;:-о. (предлагае (1ый способ позволяет !..r!.,: " . -(но определить иммунологическую реакт:нность организма, учитывая при этом общую антимикробную активноеfb крови, без влияния HB нее разведения. Кромг,: . сокращается время:и угцествлени:-...:-,.; емого способа.
