Способ получения производных простана

 

ОП ИСАНЫЕ

ЫЗОВРЕТЕН ЫЯ

К ПАТЕНТУ

Союз -Соавтеинк

Соцнаянстнчесинк

Республик (1Ц 3001854 (6l ) Дополнительный к патенту— (22) Заявлено 08.12.78 (21) 2696152/23-04 (51) М. Кл.

С 07 С 177/00

// А 61 K 31/557. (23) Приоритет - (32) 08. 12. 77

858487, 858588, (31} 858589, 858504, (ЗЗ) США

858580, 858579

Опубликовано 28. 02.83, Бюллетень М 8 тюсударственный квинтет

СССР лю делам изобретений и открытий (оа) 3Ê 547 514.

° 71 ° 07(088. 8) Дата опубликования описания 28 ° 02,83 фт та Я 1п

Иностранец

Аллан Висснер (72) Автор изобретения

\f т-t, (США)

Иностранная фирма

"Американ Цианамид Компани" (США) (7 l ) За я ви тел ь (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ ПРОСТАНА с последующим отщеплением защитной. группы 1 1 g.

Цель изобретения - разработка способа получения новых фармакологически активных производных простана общей формулы (1).

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу, основанному на использовании реакции получения neo" в изводных простана общей формулы (1 7,. соединение общей Формулы где Q - группа -(СН2)у-, где f -целое число от 5 до 7;

С -С„-алкйл, обладающий фар макологической активностью.

Известен способ получения метилового эфира 11-диоксипростагландина Е, т > заключающийся в том, что 2-(6-карбометоксигексил) циклопент-2-енон под-вергают взаимодействию с литийкупратом формулы (- Ф11

Q О бн, бнз

Изобретение относится к способу получения новых производных простана общей формулы

Я () жанр Он

Й4 Р (!н-бнин е-в

О ..ЦбОбнрз г t g) (Я где О имеет указанные значения;

Я -гидроксил или низшая алкокси 1 группа, В -низшая алкоксигруппа, подвергают взаимодействию с литийкупратом общей Формулы

1001854

3 (Э э

1,Н7б = — э- 0 — бН =- бН- (!Н2 — З

Мг,+ (/// ) де и и Й имеют указанные значения, и в полученном рацемическом или опти-. чески активном соединении общей формулы

К перемешиваемому раствору 24 r

4-метил-4-окси-l-октена и 33,3 г имидазола в 130 мл диметилформамида при

5 С добавляют 24 мл хлортриметилсилана в течение 5 мин. Раствор перемешивают при комнатной температуре 17 ч и затем добавляют 600 мл гексана и

250 мл ледяноц воды. Гексановую фазу отделяют и промывают последовательно водой и рассолом. Раствор сушат сульфатом магния и выпаривают, получают жидкость.

Пример 3. Получение 4-метил-4-триметилсилокси- 1-(три-й-бутил-станнил)-транс-l-октена.

Перемешиваемую смесь 20 r 4-метил-4-триметилсилокси-l-октина, 28 мл три-H-бутилоловогидрида и 50 мл азобисизобутиронитрила в атмосфере азота нагревают до 85 С. После того, как начавшаяся экзотермическая реакция затихает, смесь нагревают при 130 С один час. Полученный продукт выделяют из реационной смеси.

Пример 4,. Получение 1-(1-метокси-1-метилэтокси)-8-13-(1-метокси- 1-метилэтокси)1 -5-оксо- 1-циклопентен-1 — ил-2-октанона.

К перемешиваемому раствору 31,2 г (130 моль) 1-гидрокси-8-(3-гидрокси-5-оксо-1-циклопентен-1-ил)-2-октанона в 190 мл СН Cf, высушенного над молекулярными ситами, добавляют 47 мл

2-метоксипропена с последующим добавлением 0,1 мл соляной кислоты. Поддерживают температуру 25ОС охлаждением .на водяной бане. Через 30 мин по данным тонкослойной хроматографии в этилацетате исходное вещество не обнаруживается. Присутствуют мелкие пятна с Ry 0,5 и 0,6; большое пятно с Ry 0,78. Через час добавляют еще

0,1 мл дихлоруксусной кислоты. После того, как общее реакционное время составит 2 ч, раствор разбавляют 650 мл гексана. Раствор промывают 50 мл насыщенного NaHCO> (рассолом), сушат, {К СО, NgSOy) и добавляют 0,05 мл пиридина. Растворители удаляют, получают 48,4 г {973) вещества.

ПМР (СОС1 ),Д: 7,06 (w, 1H, CHOH);

4,92 (1Н, СНО); 4,00 (с, 2Н, СН О);

3,22 (c, ЗН, OCHq); 3,18 (с, 3Н, 1 г где Я, R, Q и,К имеют указанные зна. чения, удаляют защитные группы с последующим выделением целевого продукта.

Производные простана общей форму- уо лы (I) обладают потенциальной активностью как гипотенсивные, антиязвенные агенты, используются для лечения желудочной гиперсекреции и эрозии желудка, обеспечивая защиту против уль- 25 церогенных и других желудочных затруднений, вызванных различными нестероидными противовоспалительными агентами, например, индометацин, аспирин и фенилбутазон, как бронхорасширяющие, 5в противовоспалительные, абортивные родовспомогательные средства, контро лирующие оплодотворяющие агенты и регуляторы центральной нервной системы.

В сельском хозяйстве ис.пользуются как

35 регулятор течки у коров и других домашних животных.

П р и и е р 1. Получение 4-метил-4-окси-l-октина.

К перемешиваемой суспензии амаль46 гамы, полученной из 6,2.г магния и

50 мг хлористой ртути, суспендированной при температуре кипения в 60 мл эфира, добавляют раствор смеси, состоящий из 26 г 2-гексанона и 29,8 r

45 бромистого пройаргйла в 65 мл эфира в течение 60 мин. После предварительного нагревания с обратным холодильником в течение 30 мин, полученную смесь охлаждают до 0 С и обрабатывают 35 мл насыщенного раствора хлорис5О того аммония. Смесь разбавляют эфиром и фильтруют через целит. Фильтрат промывают рассолом, сушат карбонатом калия и концентрируют. Остаток перегоняют и получают вышеуказанный продукт.

Пример 2. Получение 4-метил-4-триметилсилокси-l-октина.

5 1001

0CHg) 2,62, 2,40, 2,16 (м, 6Н,. СН55);

1,36 (м, 20Н, CH S CHgS) .

ИК (четкий): 5830 мм.

Пример 5. Получение триметилсилил-2-триметилсилоксиацетата. S

К раствдлу 15 r-(0,197 моль) гликолевой кислоты в 50 мл сухого пиридина приливают 32,3 г. (0,2 мол4 1,1, 1,3,3,3-гексаметилдисилазина. После перемешивания в течение 15 мин добав- 3о ляют по каплям 10,86 r (0,1 моль) триметилсилилхлорида. Смесь перемешивают 1 ч и затем фильтруют от белого осадка, который промывают петролейным эфиром. Фильтрат и промывные во- 15 ды концентрируют при пониженном давлении при 30О С. Остаток перегоняют (85-86 С) 15 мин, получают 38 г продукта.

Пример 6. Получение три-триметилсилилоксиэтилена.

К раствору 50,98 г (0,316 моль)

1,1,1,3,3,3- гексаметилдисилазина в . 250 мл тетрагидрофурана добавляют при перемешивании в атмосфере аргона при

0 С по каплям 133,3 мл (0,32 моль) 2,41ч-й-бутиллития в гексане. Затем раствор выдерживают при 45 С в течеЮ ние 30 мин. Раствор охлаждают до

-78 С и 58,7 г триметилсилил-2-триме- 5 тилсилоксиацетата добавляют по каплям.

После перемешивания в течение 30 мин

43,2 г (0,4 моль) триметилсилилхлорида добавляют в течение 10 мин, раствору дают нагреться до комнатной тем35 пературы в течение 30 мин. Растворитель удаляют при пониженном давлении.

Остаток смешивают с равным объемом петролейного эфира и фильтруют от суспензии хлорида лития. Растворитель .40 удаляют и остаток перегоняют (70-75 С;

1,4 мин), получают 64,65 г продукта.

Пример 7. Получение 2-16-(хлорформил)гексил -циклопент=2-ен-1-она.

К суспензии 1,94 г (0,08 моль1 гид45 рида натрия в 100 мл тетрагидрофурана добавляют при перемешивании под аргоном по каплям раствор 17 г

1 (0,08 моль) 2- (6-карбоксигексил) -циклопент-2-ен-она в 160 мл тетрагидрофурана. Затем смесь перемешивают 1 ч

15 мин, охлаждают до О С и добавляют

13 мл оксалилхлорида ° Смесь перемешивают при 0 С в течение 30 мин и при комнатной температуре 30 мин. Раствор

55 разбавляют 500 мл эфира и фильтруют через целит. Растворитель удаляют из фильтрата и остаток дважды экстрагиру854 4 ют горячим гексаном. Гексан удаляют, получают 16 г продукта.

ll. р и м е р 8. Получение 2-(8-гидрокси-7-оксо-октил)-циклопент-2-ен-1-она.

Смесь 6,3 г 2-(6-(хлорформил)гексил"1-циклопент-2-ен- 1"она и 16 г трис-триметилсилилоксиэтилена перемешивают под. аргоном при 90-100. С в течение о

1 ч. К этой смеси добавляют 25 мл диоксана и 10 мл 0,63-ной соляной кисо лоты. Смесь нагревают при 80 С в течение 30 мин. Смесь вливают в рассол и экстрагируют эфиром. Эфирный раствор промывают насыщенным бикарбонатом натрия и сушат сульфатом магния. Растворитель удаляют и остаток хроматографируют на сухой колонке селикагеля, элюируя эфиром, содержащим 2 уксусной кислоты, получают 1,7 г продукта (Rg 0,45) .

Пример 9. Получение 1,9-диоксо-11< „ 16-диокси-16-метил-1-оксиметил- 13-транс-простена.

А. К перемешиваемому раствору

75,5 г (150 моль винилолова, из которых 120 моль являются транс-изомером)

Е-1-три-H-бутилстаннил-,4-метил-4-три- ° метилсилилокси -1-октена в 120 мл тетрагидрофурана при -78 С вначале добавляют 60 мл 2,0 MH -бутиллития в гексане в течение 5 мин, чтобы температура была менее -60 С. Полученный раствор светло-янтарного цвета за

10 мин нагревают до -40 С и поддерживают эту температуру в течение 2 ч.

Затем раствор снова охлаждают до -7о С для использования в методике по пункту С.

В. К хорошо перемешиваемому раствору пентина меди (17,25 г, 132 ммоль) добавляют 48 мл (около 43,1 г или

264 ммоль) свежеперегнанного триамида гексаметилфосфора. Спустя 20 мин добавляют 300 мл эфира. Полученный прозрачный светло-желтый раствор охлаждают до -78 С за 60 мин.

С. К раствору виниллития, полученному по пункту А пр» -78 С, добавляют предварительно охлажденный раствор комплекса меди, полученного "по пунк- ту В, с помощью иглы с двойным наконечником за 10 мин, чтобы температура: не поднималась выше -65 С. Полученный раствор светло-янтарного цвета перемешивают npN -78 С в течение 60 мин.

D. К перемешиваемому раствору, .полуеенному по пункту С при -78 С, вна-. чале добавляют раствор 23,07 г

7 10018 (60,0 ммоль) 1-(1-метокси- 1-метилэтокси)-8- 3-(метокси-1-метилэтокси)-5-оксо-1-циклопент-1-ил 2-октанона в

50 мл эфира за 10 мин так, чтобы темо пература не снижалась ниже -65 С.

Шприц и ампулу с мембраной промывают

10 мл эфира. Спустя 5 мин раствор светло-янтарного цвета нагревают до

-40 С за 10 мин. Раствор перемешивао о ют при -40, С в течение 1,5 ч, а за- ;1о тем нагревают до -20 С за 30 мин, после чего снова охлаждают до -78oC Реакцию. прекращают, добавляют раствор

14,4 мл (около 240 ммоль) ледяной уксусной кислоты в 100 мл эфира. Обра- 1s зовавшийся осадок перемешивают магнитной мешалкой.

Е. Полученную смесь перемешивают с 750 мл эфира и ледяной смесью

480 мл 1 н. НС1 и 240 мл насыщенного

МН4С1. Полученную смесь интенсивно перемешивают при 0-5 С в течение 5 мин, Водные фазы выделяют и экстрагируют

350 мл эфира. Объединенные органические фазы промывают последовательно 2 раза по 240 мл ледяной 1 н. НС1, 240 мл полунасыщенного рассола, 240 мл смеси 1:1 насыщенный рассол/насыщенный NaHCO>, 240 мл полунасыщенного солевого раствора и 3 раза — насыщен- 30 ным рассолом. Раствор высушивают сульфатом магния, фильтруют через небольшой слой целита и концентрируют в ва кууме при 30 С, получают 108 г подвижной светло-желтой жидкости.

F. Продукты, полученные по пункту

Е, в этом опыте (60 ммоль, 108 г) и в аналогичном опыте (57,7 моль; 103 г) объединяют. Полученное вещество (211 г) обрабатывают раствором, полу- о ченным из 940 мл ледяной кислоты, 470 мл тетрагидрофурана и 235 мл воды. Полученный раствор перемешивают при 40-43 С в течение 60 мин. В смесь добавляют 600 мл толуола. Затем в ро- торном испарителе при температуре около 30Р С отгоняют 600 мл дистиллята.

Колбу с раствором присоединяют к стандартной вакуумной установке для перегонки с приемником, охлаждаемым смесью сухой лед-ацетон. Полученный раствор разбавляют 600 мл толуола. Затем отгоняют 600 мл дистиллята при 30 С и давлении 0,1 мл водн. ст. Раствор разбавляют 600 мл толуола и затем концентрируют до объема около 1000 мл.

Полученный раствор разбавляют 600 мл толуола (всего используют 2700 мл толуола) . Полученный раствор выпарива54 8 ют, получают 194 г смеси бесцветного тетрабутилолова и масла цвета темного янтаря.

G. Вещество, полученное по пункту

F, помещают сверху на слой силикагеля Mallinckrodt АГ CC-7 (385 г) в стеклянной колонке размером 5,8 30 см

Колонку промывают 2500 мл гексана для удаления оловосодержащего соединения, а затем 4000 мл этилацетата, чтобы извлечь все нерастворимое в гексане вещество, находящееся в колбе и на боковых стенках колонки с силикагелем в верхней части, При испарении первых 3250 см элюата этилацетата получают 77,4 t RHTBpMolo масла.

После испарения последних 750 см элюата получают 0,1 r янтарного масла (всего 77,5 r).

Н. Хроматография. В колонку диамет. ром 5,4 см,. заполненную смесью гептанэтилацетат (2:1), помещают 970 г силикагеля марки Mallincrodt АГ СС-7.

Колонку оставляют на ночь. Эту колонку (размеры ее 5,4.98 см) используют для очистки большей части продукта по пункту С (71 г).

Полученное вещество (71 г) растворяют в смеси гептан-этилацетат (2:1), 250 мл и 50 мл этилацетата, необходимого для получения раствора. Раствор проявляют на описанной колонке. Элюирование проводят при небольшом избыточном давлении азота для достижения скорости потока около 3-4 л/ч.

Фракции, выходящие из колонки, исследуют методом ТСХ, используя систему растворителя 20:1 этилацетат-метанол. Пластины, проявляют, запыляют сначала раствор 2",4-динитробензола, а затем раствор ацетата меди (2) и нагревают.

Колонку элюируют смесями гептанэтилацетат в последовательности, приведенной в табл. 1.

Собранные фракции объема около

1500-2000 мл исследуют с помощью ТСХ.

Выделяют продукт, полученный промыванием смесями, соответствующих составов (6- 10 в табл. 1) в количестве

16.9 г.

Соединения общей формулы (1) являются более специфическими по силе действия, вызывают простагландиноподобные биологические реакций и/или имеют значительно большую длительность биологической активности. Например, 11-диокси-ПГЕ соединения общей формулы (1) относительно слабо

9 10018 стимулируют гладкую мускулатуру, ммеют увеличенную стабильность и удлиненный срок действия. По сра внению с известными простагландинами соединений общей формулы (1) можно зффективно вводить орально, подъязычно, интравагинально, внутримышечно или подкожно инъекциями или инфузиями. Это облегчает поддержание равномерных уровней соединений в теле более слабыми, короткими или маленькими дозами и делает возможным введение препарата самим пациентом.

Соединения общей формулы (1) используют как бронхорасширяющие аген- 15 ты для лечения астмы и хронических бронхитов в- виде аэрозолей от 10 г до 10 мг/мл фармацевтически пригодного жидкого. носителя). По сравнению с природными простагландинами ПГА и ПГЕ щ эти соединения, в частности, отличает продолжительность действия. ПГЕ и ПГА соединения .используют для уменьшения и контроля избыточной желудочной секреции, в результате чего уменьшается д или устоаняется желудочная эрозия или образование желудочно-кишечной язвы и ускоряется вылечивание язв, уже имеющихся в желудочно-кишечном тракте.

Для этой цели соединения впрыскивают или вводят инфузией внутривенно, подкожно или внутримышечно (доза инфузии от 0,1 до 500 мг/кг веса тела в минуту; общая дневная доза инъекции или инфузии от 0,1 до 20 мг/кг веса тела) . Эти

35 соединения применяют в сочетании с различными нестероидными противовоспалительными агентами, такими как аспирин, фенилбутазон, индометацин и

T.п., чтобы свести к минимуму ульцерогенные действия последних.

ПГЕ и ПГА соединения общей формулы (I) стимулируют эпидермальную пролиферацию и кератинизацию, благодаря чему ускоряют заживление поврежденной

43 кожи, например при ожоге, ранении или хирургической операции. Кроме того, : ПГА соединения способствуют быстрому прирастанию пересаженной кожи.

Для этих целей предпочтительно местное применение соединений на или вблизи участка, где желателен рост клеток и образование кератина, в виде аэрозольной жидкости, микронизированного порошка для распыления изотонического водного раствора (в случае влажных перевязок) или в виде крема, лосьона и мази в сочетании с обычными разбавителями. В некоторых случаях, !

54 10 когда имеются значительные потери жидкости (экстенсивные ожоги или потери кожи по другим причинам) эффективными .являются внутривенная инъекция или инфузия, отдельно или в сочетании с обычными инфузиями.крови, плазмы или их заменителей. Возможно также введение подкожное или внутримышечное, оральное, подъязычное, буккальное или вагинальное. Вблизи участка применяют влажные повязки при ожогах кожи второй и/или третьей степени площадью 5-25 см использованием изото 2. нического водного раствора соединения.

Простагландины применяют в сочетании с антибиотиками, в частности гентамицином, неомицином, полимиксином В, бацитрацином, стрептомицином и окситетрациклином, с другими антибактериаль" ными препаратами, такими как солянокислый мафенид, сульфадиазин, фуразолийхлорид и нитрофуразон; и с кортикостероидами, такими как гидрокорти1 зон, преднизолон, метилпреднизолон и фторпреднизолон, каждое из них используется в обычных для их индивидуального применения концентрациях.

ПГА соединения, их производные и соли повышают приток крови к почкам, увеличивают объем и содержание электролита в моче, поэтому их применяют для снятия почечной дисфункции, особенно в случаях затрудненного непарного почечного притока крови, например почечно-печеночного синдрома. В случае избыточной или несоответствую- щей секреции гормона АДН диуретичес-; кое действие этих соединений еще более высокое.

Вазопрессивное действие этих соединений проявляется в анефретическом состоянии.

ПГЕ соединения используются как местные сосудорасширяющие препараты, а также при необходимости ингибироФ вать скопление тромбоцитов, чтобы снизить их адгезионный характер, снять и предохранить образование тромбов. Эти соединения применяют, например, для лечения и предупреждения инфарктов миокарда и послеоперационного тромбоза. Соединения вводят внутривенно, подкожно, внутримышечно и в виде стерильных имплантатов продолжительного действия. Для быстрой реакции, особенно в состоянии беременности, предпочтительным является

В внутривенный способ введения. Исполь-.

11 10018 зуют дозы от 0,005 до 20 мг/кг веса тела в день.

Ингибирование скопления тромбоцитов in vitro осуществляют по следующей методике.

4еловеческую плазму, богатую протеином, инкубируют с модифицированным раствором тирода (40-50 ). ПГЕ соединения вводят в различных концентрациях и после:5 мин инкубации добавляют 10 такой агрегирующий агент, как аденозиндифосфат или коллаген. Изменение оптической плотности (светорассечение) регистрируют глазом и отмечают ингибирование (-) и отсутствие ингибирова- 15 ния (+) . Испытуемые соединения считаются активными, если они ингибируют скопление тромбоцитов, вызванное аденозиндифосфатом или коллагеном в концентрации 0,025 мг/мл или менее, в щ течение 5- 10 мин. Например, 1,9-диоксо-15-окси-l-оксиметилен-13-транс-простен показывает ингибирование скопления тромбоцитов, вызванного как аденозиндифосфатом, так и коллагеном, уЗ при концентрации 0,025 мг/мл.

ПГЕ соединения оказывают бронхорасширяющее действие, как определено в тексте с использованием анестезированных собак с искусственным дыхани- у ем и испытывающих непрерывный респираторный спазм, вызванный пилокарпином.

Используют дворняжек любого пола, весящих 5- 10 кг Им вводят подкожно 35 солянокислый морфин(1,5 мг/кг). Внутривенную перфузию 5 /aec (объем) хлоразола начинают через полчаса после инъекции морфина таким образом, чтобы в течение 15 мин ввести 60 мг/кг.

46

В течение всего эксперимента поддерживают непрерывную перфузию 10 мг/кг ч.

Собаке делают искусственное дыхание с помощью Стерлинг-насоса со скоростью 20 вдохов в минуту. Объем устанав4S ливают в соответствии с весом животного. Все измерения выполняют íà собаках, положенных навзничь на подогреваемый V-образный стол. Получают кураризацию сукцинилхолинхлоридом, 50 используя исходную инъекцию 3 мг/кг в течение 3 мин с последующей непрерывной перфузией 0,1 мл/кг мин.

Респираторный спазм инициируют начальной инъекцией 400 мг/кг солянокислого пилокарпина 5 мин. Возможно увеИ личение или уменьшение дозы солянокислого пилокарпина в зависимости от наблюдаемого действия на сопротивле—

54 12 ние воздушного пути. Перед началом непрерывной перфузии солянокислого пилокарпина отсрочку 15 мин наблюдают при дозе 4 мгк/кг мин, чтобы поддержать постоянный спазм во время испытания.

Вводят металлическую канюлю и закрепляют после трахеотомии. Катетеризуют для впрыскивания различных агентов две головные и две бедренные вены. Бедренную артерию катетеризуют, чтобы измерить системное давление крови. Пищеводный баллон (11. 2,5 см) вводят в нижнюю треть азофага для измерения эндорагического давления. Измерение потока воздуха осуществляют с помощью пневматахографа флейша, связанного с трахейной трубкой.

Транслегочное давление измеряют следующим образом.

Трахейную канюлю аксиальной .трубкой из нержавеющей стали (1,5 мм), которая закрыта на конце и защищена на расстоянии 2,5 см от конца канюли.

В последнем сегменте просверлены три полости диаметром 1 мм. Трубка, используемая для измерения трахеального давления, связана с одной или двумя камерами дифференциального датчика

Санборн 267 8/С. Другая камера связана с пищеводным баллоном с помощью полиэтиленового катетера такой же длины и характеристик, как и у баллона.

Воздушный поток из пневмотахографа флейша измеряют при помощи дифференциального датчика Санборн 270.

Объем вдох-выдох получают электронным интегрированием сигнала потока с использованием PC интегратора.

Системное и легочное давление крови регистрируют с помощью датчика давления Санборн В/С или 1280 В. Все эти параметры регистрируются на полиграфе Санборна. Транслегочное давление и объем вдоха-выдоха представляют в прямоугольных координатах на осциллоскопе.

Испытуемые соединения вводят аэрозольным путем. Микрораспыпительный респиратор Бердд Марк 7 соединяют с металлической канюлей сразу после пневмотахографа. Струя испытуемого соединения в аэрозоле P вытекает под давлением 2 кг/см, попадая в микрораспылитель как раз во время одного цикла вдыхания..Мирокраспылитель установлен на респираторной трубке во время порыва струи. Взвешивают непосредственно до и после введения, что13 10018 бы определить количество, введенного испытуемого соединения.

В табл. 2 показан процент ингибирования спазма, вызванного пилокарпином, для некоторых соединений по изоб- $ ретению. Каждой собаке вводят примерно 50 мг раствора.Используют неанестезированных беспородных собак, весом 10- 15 кг. Животные имеют хирургически выполненный 10 мешок, не содержащий нервов, который осушают под действием силы тяжести через титановую канюлю. Эти животные прйучены стоять спокойно в опоре Павлова. Желудочную секрецию стимулируют t$ с очень низкой скоростью, давая стабильную секрецию (25-40 от максимальной с кислым фосфатом гистамина, 3050 г/кг ч). При такой стимуляции стабильный выход желудочного секрета 26 зычно может поддерживаться в течение 3 ч.

Во .время изучения секреции постоянно собирают желудочный сок,и создают объединенную 15-минутную коллекцию. 2$

Определяют собранный объем, рН и титруемую кислотность. Кислоту определяют титрованием аликвота желудочного обравца 0,1 н. раствором едкого натра до рН 7,0, используя автоматический з» титратор.

Лекарства вводят на основе субмаксимальной стимуляции желудочной секреции результаты сравниваются с контР рольными исследованиями секреции без использования лекарства. Лекарство вводят оральным путем в главный желудок. Этот путь легко осуществим и не допускает скоплений желудочного сока.

Например, одно из ПГЕ соединений

1,9-диоксо-11о(, 16-диокси-16-метил-1-оксиметил-5-цис-13-транс-простадиен вводят в желудок одной из собак дозой 100 мг/кг.

4$

Объем и титруемая кислотность желудочного сока после введения 100 мг/кг приведены в табл. 3 (средние величины четырех испытаний на одну собаку).

Секреция желудочной кислоты в фистуле собаки.

Трем беспородным собакам (20-32 кг) вставляют канюли из нержавеющей стали в наиболее зависимую часть брюшного желудка и выводят наружу через живот для сбора желудочных секретов. Собаки приучены стоять спокойно в .опоре

Павлова и во время последующего изучения секреции находятся в сознании

54 14

Действие 1,9-диоксо-11<, 16-диокси-16-метил-1-оксиметил-13-транс-простена (А) и 1, 9-диоксо- l Ì, 16-диокси.-16-метил- l -оксиметил-5-цис-13-транс-простадиена (Б) на секрецию желудочной кислоты а в приготовленной фистуле собаки показано в табл.,4 (после 26 ч поста секреция желудочной кислоты . субмаксимально стимулирована, .начинается через 45 мин после введения лекарства, используется постоянная внутривенная инфуэия кислого фосфзта . гистамина - 40 r/êã/÷) .

Вызывание язв.

Самцов крыс "Спарг-Дайлей Дер вдн (лаборатория Локк-Эрикон, Иайвуд, Иллино 1с), весящих 150-200 r, заставляют поститься и обеспечивают питьевой водой за 16-19 ч до начала испытания.

Крысам орально вводят соединение или носитель (приблизительно 0,5 мл), а затем сажают в клетки типа Волльмана. .Через 5 мин после введения лекарства животных погружают (хвостом вниз) до уровня плеч в водяную баню температурой 22 С íà 100 мин. В конце этого животных обезглавливают и их желудочки быстро вырезают с примерно 5 мм каждого эзофага и двенадцатиперстной кишки.

Срезанный под тупым углом желудок вскрывают по наибольшей кривизне, начиная с верхушки рубца через железистую слизистую в привратник желудка и открывают кусочек двенадцатиперстной кишки вдоль края. Обрезки удаляют из желудка, промывая солевым раствором при комнатной температуре и осторожно промокают его марлей или фильтровальной бумагой. Затеи желудок раскладывают слизистой вверх на регистрационной карте или другом аналогичном материале.

Оценка повреждения.

Подсчитывают повреждения с помощью освещенного .увеличительного стекла (для общего подсчета повреждений}.

Отметка для каждого повреждения дана в табл.

Очень большие (по площади) неперфорированные язвы часто видны, имеют диаметр больше 3 мм и оценены как кратные 7. Например, язва диаметром

3 мм имеет площадь 7,1 мм2-. Язва размером 9 4 мм, имеет площадь 36 мм и, 2. следовательно, является эквивалентом

5-и язвам с оценкой 7.

В54

Порция Объем

5:3

3:2

I0:9

1:1

Этилацетат- гептан

3:2

2:1

15 1001

Действие простагландинов на язвы, вызванные стрессом (погружением) у крыс, показано в табл. 6.

Вызванные индометацином язвы у крыс.

Самцов крыс Вистар (Ройал Харт, Нью Хемптон, Н.И), весящих 190-210 г, распределяют на контрольную и обрабатываемые группы (5 крыс в группе) и каждую крысу сажают в клетку. Период испытания 52 ч. В течение первых 33 ч >6 крысам дают в избытке пищу и питьевую воду, но затем заставляют поститься в течение ночи перед умерщвлением.

Индометацин суспендируют (4 мг/мл) в

1,5>-ном растворе крахмала в фосфат- 15 ном буфере (КФБР). 115,574 растворяют в количестве 10 мг/мл в этаноле, а затем разбавляют в КФБР до концентрации 0,1 мг/мл или до более низкой концентрации, какая требуется. Суспензию çî индометацина вводят лодкожно (10 мг/кг суспензию простагландина дают в количестве 0,5 мгlкг или менее на день 0 и 1. Крысы получают только одну дозу простагландина и индометацина в день 1З спустя 2, 6 ч их убивают хлороформом.

Желудки вырезают, вскрывают по наибольшей кривизне и осторожно промывают в чашке с водой. Затем их раскладывают слизистой вверх и прикалывают к одинаковым корковым пластинам размером 2,5 дюйма в диаметре, пронумерованным на обороте.

Желудки произвольно оценивают в со. ответствии со следующей шкалой (10):

0 - норма;

1 - петехиальные кровоточащие участки или очень маленькие язвочки;

2 - одна или две маленькие язвочки или кровоточащая эрозия;

3 - большие площади кровоточащей эрозии или язв малого размера;

4 - массивные площади кровоточащей эрозии или много язв, главным образом больших.

Кишки также удаляют и исследуют на наличие язв, которые оцениваются в соответствии со шкалой, приведенной ниже:

0 - норма;

1 — слизистая тонкая, петехиальные . кровотечения;

2 - "свищи", когда кишки надуваются воздухом; . 3 — малые язвы. Кишки более хрупкие, чем нормальные, разрывы вдоль линии прикреплений брыжейки, при удалении;

4 - много больших перфорированных язв, слипания, кишки кровоточащие и очень хрупкие, легко прорезаются и не могут быть удалены без повреждений. Сортировка.

Действие 1,9-диоксо-1 kj,16-диокси-16-метил-1-окси-метил-13-транс-простена на язвы, вызванные индометацином у крыс, показано в табл. 7.

Таблица 1

Соотношение растворителей

Гептан-этилацетат

1001854

Продолжение табл.. 1

12

3:1

Табли ца 2

5 30 60

70

3,2

Таблица 3

Время после Объем, мл Кислота (мк/15 мин) введения, мин

0,43

3,4

2,6

0,35

0,22

0,20

60

0,09

0 7

0,13

0,9

0,21

0,27

105

0,40

2,7

120

1, g""Äèîêñî-1 М, 16-диокси-16-метил-1-оксиметил-13-транспростен

Доза, мг/мл

Ингибирование спазма, вызванного пилокарпином, после введения лекарства, 4à за мин ) l

1001854

Табли ца 4

Доза, r/êг

Двухчасовая кумулятивная желудочная секреция", .Обработка

Объем, мл Кислота/мзк + Н ф

130-11 17,2-1,6

59+19 6,9+2,8

Ф (р < 0,01) (p c О, 005) 10 6

76+16 7,5 2,1

Соединение Б (р с 0,05) (р с 0,005) П р и м е ч а н и е. Каждой из трех собак вводят 6-7 раз носи1 тель (контроль) и один-три раза каждое соединение.

Таблица 5

Оценка

Тип повреждения

Нет повреждения

Эритема

Петехиальные кровоточащие участки

Эрозия

Очень маленькая язвочка

Маленькая язва (0,5-1 мм) Средняя язва (1-3 мм) Большая язва (3 мм) Перфорация

Таблица 6

Соединение Доза, мг/кг

P.0./

Уменьшение, оу

Контроль

А"

500

200

Контроль

Соединение А

10 6

Оценка язвы (средняя Ф

+ ЕМ/и) 40-5(27)

2+1 (10)

6-3(5) 95/p(0,001/

85/рс 0,01/

1001854

21

Продолжение табл. 6

82(р с 0,01)

67(р с 0,005) 7+2 (6) 13+7 (13) 7+6(7) 500

200

82 (р.с 0,00.5) 16

6+4 (6) -85(р < 0,005) 62(p 0,05) 15+11 (6) П р и м е ч а н и е. А - 1,9-Диоксо-lid;16-диокси-16-метил (. ъ

-1-оксаметил-5-цис-13-транс-простадиен;

В 1,9-диоксо- l ld,16-диокси- l б-метил-1-оксиметил-13-транс- простен.

Таблица, 7

Об работка

Оценка язвы Гематокрит кишечника

Оценка язвы желудка (средняя + S ) А (средняя

ЕМ (средняя

+ ) 2,9 + +0,2

° 10

0.5 10

2,1+ 0,4

1,7+ 0,3

1,9 «+ 0,4

41,1 + 2,4

27+02

3,5+ 0,2 35,6+ 1,9

1 0.0 3+ 0,2@

48,0 + 0,6

Ов

Формула изобретения где Я - группа -(CQ)y-, где. f - це-. лое число от 5 до 7;

R - С -С -алкил

Ф отличающийся тем, что соединение оощей Формулы

Способ получения производных простана общей Формулы

О .qdodugoH

3 н5 (Н бн(на - В..Чбобнюв г!

Я1

ИндометацИн, мг/кг, подкожно

Соединение, мг/кг

0,1 10

0,02 8

2,7+ 0,2

2,0+ 0,4

33 1+2,1

40,0 + 1,4

001854 24

R -низшая алкоксигруппа, подвергают взаимодействию с литийкупратом общей формулы

g>a

C,H7á á-Ри-бн-,бн- бн б — к Li

I где R и R< имеют указанные значения, и в полученном рацемическом или опти- 30 чески активном соединении общей формулы

Составитель Т. Левашова

Редактор Н. Кешеля Техред Т. фанта Корректор

Тираж 41б Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Заказ 1462/78

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

23 1 где (} имеет указанные значения;

R -гидроксил или низшая алкоксигруппа;

rAe Q, R, R a R имеют указанные значения, удаляют защитные группы с последующим выделением-целевого продукта..

Ф

Источники информации принятые во внимание при экспертизе

1. Kluge А.F. et аl. Synthesis of

Prostaglandins Models and Prostaglandins by Conjugate Addi tion of a Funct iona l i zed Organocopper Reagent. -D.

Am. Chem. Soc., 1972, ч. 94, р. 7827