Диагностическое устройство для выявления белка, связывающего жирные кислоты (бсжк), методом иммунохроматографического анализа

Полезная модель относится к диагностической медицине и может быть использована для выявления раннего инфаркта миокарда, как в домашних условиях, так и врачами скорой помощи. Предложено диагностическое устройство для выявления белка, связывающего жирные кислоты (БСЖК), методом иммунохроматографического анализа, содержащее полоску из листового полипропилена, на среднюю часть которой приклеена мембрана из нитрата целлюлозы с нанесенными на свободную поверхность тестовыми линиями из моноклональных антител к БСЖК и контрольной линии из антимышиных антител. Причем мембрана с одной стороны контактирует с приклеенной к полоске из листового полипропилена абсорционной бумагой, а с другой стороны мембрана контактирует с наклеенной на полоску из листового полипропилена бумагой из полиэстера с нанесенным и высушенным конъюгатом мышиных моноклональных антител к БСЖК с коллоидным золотом. Бумага из полиэстера контактирует с приклеенной на полоску из листового полипропилена абсорбционной бумагой для образца. Отличительной особенностью заявляемого диагностического устройства является то, что на первую тестовую линию от абсорционной бумаги для образца нанесены антитела к БСЖК концентрацией 1,5-2,0 мг/мл, на вторую тестовую линию нанесены антитела к БСЖК концентрацией 0,3-0,6 мг/мл, а на контрольную линию нанесены антимышиные антитела концентрацией 0,4-0,5 мг/мл. Технический результат заключается в повышении достоверности показаний устройства. 3 з.п. ф-лы, 1 илл.

Полезная модель относится к диагностической медицине и может быть использовано для выявления раннего инфаркта миокарда или острой сердечной недостаточности, как в домашних условиях, так и врачами скорой помощи.

Известно диагностическое устройство Кардиодетект (CardioDetect), разработанное компанией Rennesens GmbH (Германия), представляющее собой иммунохроматографический экспресс-тест, состоящий из комбинации пористых материалов и биологических компонентов, таких, как подушка конъюгата, содержащая антитела к БСЖК, конъюгированные с коллоидным золотом, нитроцеллюлозная мембрана с тестовой и контрольной линиями с иммобилизованными антителами, подушка для внесения образца и адсорбирующая подушка. Недостатком известного диагностического устройства является низкая достоверность его показаний. Так во время болевого синдрома невозможно определить степень развития болезни.

Задачей, решаемой полезной моделью, является создание диагностического устройства для выявления белка, связывающего жирные кислоты (БСЖК), методом иммунохроматографического анализа лишенного указанного недостатка. Техническим результатом заявляемой полезной модели является повышение достоверности показаний устройства.

Для решения поставленной задачи, а также для достижения заявленного технического результата предлагается диагностическое устройство для выявления белка, связывающего жирные кислоты (БСЖК), методом иммунохроматографического анализа, содержащее полоску из листового полипропилена, на среднюю часть которой приклеена мембрана из нитрата целлюлозы с нанесенными на свободную поверхность тестовой линией из моноклональных антител к БСЖК и контрольной линии из антимышиных антител. Причем мембрана с одной стороны контактирует с приклеенной к полоске из листового полипропилена абсорционной бумагой, а с другой стороны мембрана контактирует с наклеенной на полоску из листового полипропилена бумагой из полиэстера с нанесенным и высушенным конъюгатом мышиных моноклональных антител к БСЖК с коллоидным золотом. Бумага из полиэстера контактирует с приклеенной на полоску из листового полипропилена абсорбционной бумагой для образца. Отличительной особенностью предлагаемого устройства является то, что на свободную поверхность мембраны нанесена вторая тестовая линия, при этом на первую тестовую линию от абсорционной бумаги для образца нанесены антитела к БСЖК концентрацией 1,5-2,0 мг/мл, на вторую тестовую линию нанесены антитела к БСЖК концентрацией 0,3-0,6 мг/мл, а на контрольную линию нанесены анти-мышиные антитела концентрацией 0,4-0,5 мг/мл.

Дополнительно предлагается плотность нанесения антител на все линии установить в интервале 1,0-1,5 мкл/см.

Дополнительно предлагается конъюгат антител к БСЖК с коллоидным золотом выполнить из частиц золота размером 28-30 нм в количестве A₅₂₀ 23-32 у.о.е. с разведением в 9-13 раз и плотностью нанесения 3-6 мкл/см..

Также дополнительно предлагается диагностическое устройство поместить в защитный корпус с двумя отверстиями, одно их которых расположено над адсорбционной бумагой для образца, а другое расположено над тестовыми и контрольной линиями.

Выполнение диагностического устройства с двумя тестовыми и одной контрольной линиями с указанными концентрациями антител позволяет выявить нормальное состояние пациента или две фазы развития болезни: либо сердечную недостаточность, либо острый инфаркт миокарда (ОИМ). Таким образом, достигается технический результат.

На фиг.1 представлен один из вариантов выполнения заявляемого устройства, где 1 - полоска из листового полипропилена, 2 - мембрана из нитрата целлюлозы, 3 и 4 первая и вторая тестовые линии из моноклональных антител к БСЖК, 5 - контрольная линия из анти-мышиных антител, 6 - абсорционная бумага, 7 - бумага из полиэстера с нанесенным и высушенным конъюгатом мышиных моноклональных антител к БСЖК с коллоидным золотом, 8 - абсорбционная бумага для образца, 9 - защитный корпус, 10 - первое отверстие в защитном корпусе, 11 - второе отверстие в защитном корпусе.

Устройство работает следующим образом. Образец крови наносят на абсорбционную бумагу для образца 8 через первое отверстие 10 в защитном корпусе 9. Белок, связывающий жирные кислоты (БСЖК), находящийся в образце крови, взаимодействует с конъюгатом мышиных моноклональных антител к БСЖК, конъюгированными с коллоидным золотом и нанесенными на бумагу из полиэстера 7. В результате образуется окрашенный комплекс антиген-антитело. Образовавшийся окрашенный иммунный комплекс движется под действием капиллярных сил вдоль мембраны из нитрата целлюлозы 2 и взаимодействует с иммобилизованными на первой тестовой линии 3 моноклональными антителами к БСЖК. В результате первая тестовая линия 3 окрашивается в пурпурный цвет. Не связавшийся на первой тестовой линии 3 окрашенный комплекс антиген-аантитело, мигрирует далее вдоль мембраны из нитрата целлюлозы 2 и взаимодействуют с иммобилизованными на второй тестовой линии 4 моноклональными антителами к БСЖК. Если и вторая тестовая линия окрашивается в пурпурный цвет, то у пациента острый инфаркт миокарда. Окрашивание в пурпурный цвет из двух тестовых линий 3, 4 только второй линии 4 означает, что у пациента острая сердечная недостаточность. Не связавшийся на первой и второй тестовых линиях 3, 4 окрашенный комплекс антиген-антитело, мигрирует далее вдоль мембраны из нитрата целлюлозы 2 и взаимодействуют с иммобилизованными на контрольной линии 5 анти-мышиными антителами. В результате появляется третья окрашенная пурпурная линия. Окрашивание в пурпурный цвет только контрольной линии означает, что пациент здоров. При этом, контрольная линия 5 должна проявляться всегда, независимо от присутствия БСЖК в образце крови. Отсутствие окрашенной контрольной линии 5 означает, что анализ проведен не правильно, и его надо повторить на новой тест-полоске. Оценка результата анализа осуществляется визуально через второе отверстие 11 в защитном корпусе 9. При окрашенных в пурпурный цвет тестовых и контрольной линий - острый инфаркт миокарда. При окрашенных второй тестовой и контрольной линий - острая сердечная недостаточность. Окрашенная только контрольная линия - норма.

1. Диагностическое устройство для выявления белка, связывающего жирные кислоты (БСЖК), методом иммунохроматографического анализа, содержащее полоску из листового полипропилена, на среднюю часть которой приклеена мембрана из нитрата целлюлозы с нанесенными на свободную поверхность тестовой линией из моноклональных антител к БСЖК и контрольной линии из антимышиных антител, причем мембрана с одной стороны контактирует с приклеенной к полоске из листового полипропилена абсорционной бумагой, а с другой стороны мембрана контактирует с наклеенной на полоску из листового полипропилена бумагой из полиэстера с нанесенным и высушенным конъюгатом мышиных моноклональных антител к БСЖК с коллоидным золотом, а бумага из полиэстера контактирует с приклеенной на полоску из листового полипропилена абсорбционной бумагой для образца, отличающееся тем, что на свободную поверхность мембраны нанесена вторая тестовая линия, при этом на первую тестовую линию от абсорционной бумаги для образца нанесены антитела к БСЖК концентрацией 1,5-2,0 мг/мл, на вторую тестовую линию нанесены антитела к БСЖК концентрацией 0,3-0,6 мг/мл, а на контрольную линию нанесены антимышиные антитела концентрацией 0,4-0,5 мг/мл.

2. Диагностическое устройство по п.1, отличающееся тем, что плотность нанесения антител на все линии находится в интервале 1,0-1,5 мкл/см.

3. Диагностическое устройство по п.1, отличающееся тем, что конъюгат антител к БСЖК с коллоидным золотом выполнен из частиц золота размером 28-30 нм в количестве А₅₂₀ 23-32 у.о.е. с разведением в 9-13 раз и плотностью нанесения 3-6 мкл/см.

4. Диагностическое устройство по п.1, отличающееся тем, что оно помещено в защитный корпус с двумя отверстиями, одно их которых расположено над адсорбционной бумагой для образца, а другое расположено над тестовыми и контрольной линиями.